در حال حاضر، عفونتهای کووید{0}} پیچیده و متنوع هستند و تشخیص اسید نوکلئیک ویروسی، بهعنوان یک اقدام تشخیصی سریع جریان اصلی، اهمیت ویژهای دارد. در حال حاضر، فناوریهای تشخیصی دقیق، سریع و بصری اسید نوکلئیک در یک جریان بیپایان، از PCR تا فناوری تقویت همدما با واسطه حلقه تا فناوری RPA، در حال ظهور هستند. شکی نیست که این فناوری های جدید چرخه تشخیص بیماری را بسیار کوتاه کرده اند و می توانند در عرض ده ها دقیقه پیاده سازی شوند. تقویت سریع و تعیین نتیجه اسیدهای نوکلئیک نیز استفاده خانگی از آزمایش اسید نوکلئیک را ممکن می سازد.
استخراج اسید نوکلئیک اولین مرحله در تشخیص اسید نوکلئیک است. کیفیت و یکپارچگی استخراج مستقیماً بر تحقیقات یا تشخیص بالینی تأثیر می گذارد. رااستخراج سنتی اسید نوکلئیکروش، روش مهره مغناطیسی است. مراحل عملیات عبارتند از: قبل از جمع آوری نمونه، باید مقدار کافی محلول لیز را به لوله معرف اضافه کنید، نمونه را جمع آوری کنید و سپس آن را برای لیز در محلول لیز قرار دهید. پس از اتمام عملیات لیز، از دستگاه پیپتینگ استفاده کنید. از تجهیزات یا دستگاه مغناطیسی برای حذف دانه های مغناطیسی از لوله واکنش استفاده کنید. دانه های مغناطیسی جذب شده با اسید نوکلئیک را در یک لوله آزمایش جدید قرار دهید و مقدار کافی مایع شوینده را اضافه کنید. شستشو را انجام دهید. دانه های مغناطیسی را جدا کنید و محلول نمونه اسید نوکلئیک خالص را بدست آورید. از یک پیپت یا دستگاه پیپت برای کشیدن نمونه از محلول واکنش شسته شده استفاده کنید. نمونه را برای تشخیص بعدی اعمال کنید.
یک لوله معرف ترکیبی استخراج اسید نوکلئیک، شامل یک لوله از پیش نصب شده محلول لیز (1)، یک درپوش انتقال (2)، یک لوله از پیش نصب شده محلول شستشو (3)، یک درپوش آب بندی سوراخ نمونه برداری (4)، و یک لوله مغناطیسی بطری افزودن محلول مهره (5) و پایه نگهدارنده (6)؛
لوله از پیش نصب شده محلول لیز (1) دارای انتهای بالایی باز است، روی پایه پشتیبانی (6) نصب می شود و با محلول لیز بارگذاری می شود.
پوشش انتقال (2) شامل بدنه اصلی روکش انتقال و پوشش سگک اول است. انتهای بالایی و پایینی بدنه اصلی پوشش انتقال باز است و دهانه انتهایی پایینی را می توان با دهانه انتهایی لوله از پیش نصب شده لیزات (1) جدا کرد. اتصال، دهانه انتهایی بالایی آن به طور قابل جابجایی با اولین پوشش سگک درگیر می شود، که از طریق دنده های اتصال به دیواره بیرونی بدنه پوشش انتقال متصل می شود. یک آهنربای دائمی در اولین پوشش سگک تعبیه شده است.
انتهای بالایی و پایینی لوله از پیش نصب شده مایع لباسشویی (3) باز است و دهانه انتهایی بالایی را می توان به صورت جداشدنی و مهر و موم به دهانه انتهایی پایین بدنه پوشش انتقال متصل کرد و دهانه انتهایی پایین یک سوراخ نمونه برداری است. و سوراخ نمونهگیری به درپوش وصل میشود. پوشش آببندی (4) سوراخ نمونهگیری بهصورت جداشدنی و مهر و موم متصل میشود. لوله از پیش نصب شده مایع لباسشویی (3) از مواد قابل فشار ساخته شده است و با مایع شستشو بارگیری می شود.
پوشش آب بندی سوراخ نمونه برداری (4) روی پایه پشتیبانی (6) نصب شده است و لوله از پیش نصب شده مایع شستشو (3) ثابت است.
بطری نمونه برداری مایع مهره مغناطیسی (5) با مایع مهره مغناطیسی بارگیری می شود.
به عنوان یک پیشرفت بیشتر، لوله معرف ترکیبی استخراج اسید نوکلئیک شامل یک درپوش سگک دوم است که میتوان آن را با دهانه بالای لوله از پیش نصب شده محلول لیز به صورت جداشدنی کمانش کرد (1). درپوش سگک دوم کلاهک سگک از طریق دنده های اتصال به دیواره بیرونی لوله از پیش نصب شده لیزات (1) متصل می شود.
به عنوان یک بهبود بیشتر، یک شیار ضد لغزش بر روی دیواره خارجی بدنه اصلی پوشش انتقال ارائه شده است.
به عنوان یک بهبود بیشتر، یک ساختار زبانه در داخل بدنه اصلی پوشش انتقال ارائه می شود و ساختار زبانه می تواند تداخلی را با دیواره داخلی دهانه بالایی لوله پیش از نصب لیزات ایجاد کند (1).
به عنوان یک پیشرفت بیشتر، یک باس در دهانه بالایی بدنه پوشش انتقال، یک سوراخ فرورفته در اولین پوشش سگک در نظر گرفته شده است، و باس و سوراخ پیشخوان به طور جداشونده درگیر می شوند.
به عنوان یک پیشرفت بیشتر، اتصال آب بندی قابل جدا شدن یک اتصال رزوه ای است.
به عنوان یک بهبود بیشتر، دنده هایی در پوشش سگک اول در نظر گرفته شده است تا آهنرباهای دائمی به صورت تداخلی در پوشش سگک اول قرار گیرند.
به عنوان یک بهبود بیشتر، باز شدن انتهای بالایی لوله پیش نصب مایع شستشو (3) با پله ای ارائه می شود که الزامات آب بندی فیلم آلومینیومی را برآورده می کند.
روش کاربرد لوله معرف ترکیبی استخراج اسید نوکلئیک فوق شامل مراحل زیر است:
S1، پوشش انتقال (2) که روی لوله از پیش نصب شده محلول لیز (1) مهر و موم شده است را باز کنید، نمونه جمع آوری شده را در بدنه لوله از پیش نصب شده محلول لیز (1) قرار دهید و واکنش لیز را انجام دهید.
S2، پس از واکنش لیز، محلول مهره مغناطیسی را در بطری پیش بسته بندی محلول مهره مغناطیسی (5) به لوله پیش بسته بندی محلول لیز (1) اضافه کنید و خوب تکان دهید.
S3، درپوش انتقال 2 را دوباره به لوله از پیش نصب شده لیزات (1) ببندید، اولین سگک درپوش انتقال (2) را به دهانه بالایی بدنه درپوش انتقال ببندید و لوله از پیش نصب شده لیزات را قرار دهید (1) ) آن را وارونه کنید تا مایع واکنش غرق شود و از آهنربای دائمی برای گرفتن دانه های مغناطیسی که اسید نوکلئیک را جذب کرده اند استفاده کنید.
S4، پس از جذب مهره های مغناطیسی، درپوش انتقال (2) را از لوله از پیش نصب شده محلول لیز (1) باز کنید و کلاهک منتقل شده (2) را به صورت جدا شده و مهر و موم شده با دانه های مغناطیسی جذب شده به محلول شستشو وصل کنید. لوله نصب شده (3)، اولین پوشش سگک روی درپوش انتقال (2) را باز کنید تا آهنربای دائمی جدا شود و دانه های مغناطیسی آزاد شوند. لوله از پیش نصب شده مایع لباسشویی (3) را تکان دهید و مهره های مغناطیسی روی درب انتقال (2) را تمیز کنید. شستشو؛
S5، پس از شستشوی کامل اسید نوکلئیک، پوشش آب بندی (4) سوراخ نمونه برداری را باز کنید، لوله از پیش پر شده (3) محلول شستشو را فشار دهید و سپس نمونه را به صورت قطره ای اضافه کنید.
به عنوان یک پیشرفت بیشتر، مرحله S4 همچنین شامل بستن درپوش سگک دوم روی لوله از پیش نصب شده لیزات (1) است.